АБАГУЛЬНЕННЕ І ТЛУМАЧЭННЕ ТЭСТА
Малярыя - гемалітычная ліхаманкавая хвароба, якая перадаецца камарамі, заражае больш за 200 мільёнаў чалавек і забівае больш за 1 мільён чалавек у год.Выклікаецца чатырма відамі Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale і P. malariae.Усе гэтыя плазмодыі заражаюць і разбураюць эрытрацыты чалавека, выклікаючы дрыжыкі, ліхаманку, анемію і спленомегалию.P. falciparum выклікае больш сур'ёзныя захворванні, чым іншыя віды плазмадыяў, і з'яўляецца прычынай большасці смерцяў ад малярыі.P. falciparum і P. vivax з'яўляюцца найбольш распаўсюджанымі ўзбуджальнікамі, аднак існуюць значныя геаграфічныя адрозненні ў распаўсюджванні відаў.
Традыцыйна малярыя дыягнастуецца па дэманстрацыі мікраарганізмаў на тоўстых мазках перыферычнай крыві, афарбаваных па Гімзе, а розныя віды плазмодыю адрозніваюцца па іх з'яўленні ў заражаных эрытрацытах.Тэхніка здольная паставіць дакладны і надзейны дыягназ, але толькі ў тым выпадку, калі яна праводзіцца кваліфікаванымі мікраскапістамі з выкарыстаннем вызначаных пратаколаў, што стварае сур'ёзныя перашкоды для аддаленых і бедных раёнаў свету.
Для вырашэння гэтых перашкод распрацаваны хуткі тэст на малярыю Pf/Pv Ag.Ён выкарыстоўвае антыцелы, спецыфічныя да P. falciparum, багатаму гістыдзінам-бялком-II (pHRP-II) і да P. vivax лактатдэгідрагеназы (Pv-LDH), каб адначасова выяўляць і дыферэнцаваць інфекцыю P. falciparum і P. vivax.Тэст можа праводзіцца непадрыхтаваным або мінімальна кваліфікаваным персаналам без лабараторнага абсталявання
ПРЫНЦЫП
Хуткі тэст на малярыю Pf/Pv Ag - гэта храматаграфічны імунааналіз з бакавым патокам.Кампаненты тэст-палоскі складаюцца з: 1) кан'югатнай падушачкі бардовага колеру, якая змяшчае мышыныя антыцелы супраць Pv-LDH, кан'югаваныя з калоідным золатам (кан'югаты Pv-LDH-золата) і мышыныя антыцелы супраць pHRP-II, кан'югаваныя з калоідным золатам (pHRP-II-кан'югаты золата), 2) палоску з нітрацэлюлознай мембранай, якая змяшчае дзве тэставыя палоскі (палосы Pv і Pf) і кантрольную паласу ( дыяпазон C).Паласа Pv папярэдне пакрыта іншым мышыным спецыфічным антыцелам супраць Pv-LDH для выяўлення інфекцыі Pv, паласа Pf папярэдне пакрыта поліклональнымі антыцеламі супраць pHRP-II для выяўлення інфекцыі Pf, а паласа C пакрыта казіным антымышыным IgG.
Падчас аналізу адэкватны аб'ём узору крыві ўносіцца ў лунку для ўзору (S) тэст-касеты, у буферную лунку (B) дадаецца буфер для лізісу.Буфер змяшчае дэтэргент, які лізіруе эрытрацыты і вызваляе розныя антыгены, якія капілярна мігруюць праз палоску, якая знаходзіцца ў касеце.Калі Pv-LDH прысутнічае ва ўзоры, ён звязваецца з кан'югатамі Pv-LDH і золата.Затым імунакомплекс захопліваецца на мембране антыцеламі супраць Pv-LDH з папярэдне пакрытым пакрыццём, утвараючы паласу Pv бардовага колеру, што паказвае на станоўчы вынік тэсту Pv.У якасці альтэрнатывы pHRP-II, калі ён прысутнічае ва ўзоры, будзе звязвацца з кан'югатамі pHRP-II і золата.Затым імунакомплекс захопліваецца на мембране антыцеламі супраць pHRP-II, якія папярэдне пакрытыя, утвараючы паласу Pf бардовага колеру, што паказвае на станоўчы вынік тэсту на Pf.Адсутнасць тэставых палос сведчыць аб адмоўным выніку.Тэст змяшчае ўнутраны кантроль (паласа C), якая павінна дэманстраваць бардовы колер паласы імунакомплексу казіных анты-мышыных IgG / мышыных IgG (анты-Pv-LDH і анты-pHRPII)-залатых кан'югатаў, незалежна ад развіцця колеру на любой з тэставых палос.У адваротным выпадку вынік тэсту будзе несапраўдным, і ўзор неабходна праверыць паўторна з дапамогай іншай прылады.
