АБАГУЛЬНЕННЕ І ТЛУМАЧЭННЕ ТЭСТА
Малярыя - гемалітычная ліхаманкавая хвароба, якая перадаецца камарамі, заражае больш за 200 мільёнаў чалавек і забівае больш за 1 мільён чалавек у год.Выклікаецца чатырма відамі Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale і P. malariae.Усе гэтыя плазмодыі заражаюць і разбураюць эрытрацыты чалавека, выклікаючы дрыжыкі, ліхаманку, анемію і спленомегалию.P. falciparum выклікае больш сур'ёзныя захворванні, чым іншыя віды плазмадыяў, і з'яўляецца прычынай большасці смерцяў ад малярыі.P. falciparum і P. vivax з'яўляюцца найбольш распаўсюджанымі ўзбуджальнікамі, аднак існуюць значныя геаграфічныя адрозненні ў распаўсюджванні відаў.
Традыцыйна малярыю дыягнастуюць па дэманстрацыі мікраарганізмаў на тоўстых мазках перыферычнай крыві, афарбаваных па Гімзе, і розныя віды плазмодыю адрозніваюць па іх з'яўленню ў заражаных эрытрацытах1.Тэхніка здольная паставіць дакладны і надзейны дыягназ, але толькі ў тым выпадку, калі яна праводзіцца кваліфікаванымі мікраскапістамі з выкарыстаннем вызначаных пратаколаў2, што стварае сур'ёзныя перашкоды для аддаленых і бедных раёнаў свету.
Для вырашэння гэтых перашкод распрацаваны набор для экспрэс-тэста на антыген малярыі Pf / Pan.Тэст выкарыстоўвае пару моноклональных і поліклональных антыцелаў да спецыфічнага бялку P. falciparum, гістыдынавага паўтаральнага бялку II (pHRP-II) і пару моноклональных антыцелаў да лактатдэгідрагеназы плазмодыю (pLDH), бялку, які выпрацоўваецца чатырма відамі плазмодыю, што дазваляе адначасова выяўляць і дыферэнцаваць інфекцыю P. falciparum і любым іншым тры плазмодыя.Яго можа выконваць непадрыхтаваны або мінімальна кваліфікаваны персанал без лабараторнага абсталявання.
ПРЫНЦЫП
Набор хуткіх тэстаў на малярыю Pf/Pan - гэта храматаграфічны імунааналіз з бакавым патокам.Кампаненты тэст-палоскі складаюцца з: 1) кан'югату бардовага колеру, які змяшчае мышыныя антыцелы супраць pHRP-II, кан'югаваныя з калоідным золатам (кан'югаты pHRP II-золата) і мышыныя антыцелы супраць pLDH, кан'югаваныя з калоідным золатам (кан'югаты pLDH-золата),
2) нітрацэлюлозная мембранная палоска, якая змяшчае дзве тэставыя паласы (палосы Pan і Pv) і кантрольную паласу (дыяпазон C).Паласа Pan папярэдне пакрыта моноклональными антыцеламі супраць pLDH, з дапамогай якіх можна выявіць заражэнне любым з чатырох відаў плазмодыяў, паласа Pf папярэдне пакрыта поліклональнымі антыцеламі супраць pHRP-II для выяўлення інфекцыі Pf, а паласа C пакрыта казіным антымышыным IgG.
Падчас аналізу адэкватны аб'ём узору крыві ўносіцца ў лунку для ўзору (S) тэст-касеты, у буферную лунку (B) дадаецца буфер для лізісу.Буфер змяшчае дэтэргент, які лізіруе эрытрацыты і вызваляе розныя антыгены плазмодыя, якія капілярна мігруюць праз палоску, якая знаходзіцца ў касеце.Калі pHRP-II прысутнічае ва ўзоры, ён звязваецца з кан'югатамі pHRP II і золата.Затым імунакомплекс захопліваецца на мембране антыцеламі супраць pHRPII, утвараючы паласу Pf бардовага колеру, што паказвае на станоўчы вынік тэсту на Pf.pLDH, калі ён прысутнічае ва ўзоры, звязваецца з кан'югатамі золата pLDH.Затым імунакомплекс захопліваецца на мембране антыцелам супраць pLDH з папярэдне пакрытым пакрыццём, утвараючы пан-паласу бардовага колеру, што паказвае на станоўчы вынік тэсту на плазмодый.Пры адсутнасці паласы Pan можна рэкамендаваць станоўчы вынік тэсту для любога з трох іншых плазмодыяў.
Адсутнасць тэставых палос (Pan і Pf) сведчыць аб адмоўным выніку.Тэст утрымлівае ўнутраны кантроль (паласа С), якая павінна дэманстраваць бардовы колер паласы імунакомплексу казінага антымышынага IgG / мышынага IgG (кан'югаты pHRP-II і pLDH-золата) незалежна ад развіцця колеру любой з тэставых палос.У адваротным выпадку вынік тэсту будзе несапраўдным, і ўзор неабходна праверыць паўторна з дапамогай іншай прылады.
